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冷冻胚胎保存与试管体外受精的最新研究

编辑:小佳发布时间:2019-09-19来源:泰德佳儿浏览量:

要点概述

低温保存 1972年,两个研究小组分别报道了第一次成功的小鼠胚胎冷冻保存(cp)。12个月后,第一只小牛通过冷冻胚胎出生。用同样的方法成功地从冷冻胚胎中获得了第一次人类妊娠,

低温保存
 
1972年,两个研究小组分别报道了第一次成功的小鼠胚胎冷冻保存(cp)。12个月后,第一只小牛通过冷冻胚胎出生。用同样的方法成功地从冷冻胚胎中获得了第一次人类妊娠,并成功地应用于小鼠和牛胚胎的cp;然而,仅仅是在妊娠中期的自然流产就终止了妊娠。从那时起,胚胎cp已成为人类辅助生殖(ar)的常规程序,卵母细胞cp也被引入临床训练,并得到越来越广泛的应用。那些选择超低温保存的夫妇经常问我们的专家,你能解释一下超低温保存的一些优点吗?胚胎冷冻保存要多少钱?胚胎冷冻的风险是什么?你能详细说明胚胎冷冻保存的过程吗?什么是卵母细胞冷冻保存?动物胚胎的超低温保存有可能吗?你能定义卵母细胞冷冻保存吗?什么是胚胎玻璃化冷冻?描述卵巢组织冷冻保存?什么是卵子的冷冻保存?你能解释卵母细胞冷冻成功率吗?女人能把卵子冻多久?什么是卵母细胞冷冻保存方案?你能强调精子和胚胎的冷冻保存吗?我附近有卵母细胞冷冻保存吗?冷冻保存与体外受精成功有什么关系?尽管冷冻保存是一个糟糕的课题,但阿姆利则最好的体外受精专家阿姆利则indira ivf诊所的shilpa gulati博士在下面的论文中试图以简洁的方式涵盖所有上述问题。
体外受精
威尔穆特一世,罗森莉亚。奶牛胚胎低温保存试验。兽医记录。1973年;92(26):686–690年。
 
suman妇科医生和ivf专家解释说:“胚胎冷冻减少了新鲜胚胎移植的数量,最大限度地提高了ivf周期的效率。”胚胎CP是终止胚胎移植(ET)的重要工具,由于卵巢过度刺激的机会,子宫内膜出血,血清孕激素水平升高的触发日,或任何其他非计划事件。在最佳使用阶段、方案和低温保护添加剂(CPA)方面仍有相当大的争议。冷冻保存胚胎成为活胎的平均前景约为4%,而从冷冻保存胚胎出生的婴儿不占从辅助生殖出生的婴儿总数的8%-10%。然而,毫无疑问,受精卵或胚胎的成功cp显著地提高了医学效益,并增加了伴侣在卵巢刺激和ivf的单一常规后的受孕率。结果显示,在文献中,每个卵母细胞的分娩率在2%到24%之间有显著差异。数据显示,在阿姆利则的indira ivf和不孕治疗中心,amritsar医生shilpa gulati指定的最佳ivf专家认为,接受新鲜和冷冻胚胎移植的妇女使用冷冻胚胎可获得8%的额外分娩。
 
通常,中期II(MII)卵母细胞具有非常独特的结构(即巨大的体积,对低温非常敏感,非常脆弱,高含水量,较低的表面体积比,纺锤体和其他细胞器的存在,质膜层对cpa和水等的渗透性不理想,这导致了与cp相关的复杂困难。在减数分裂完成、第二极体形成、原核迁移等受精后事件中,特定的纺锤体是重要的,以及第一个有丝分裂纺锤体的形成。典型的损伤(解聚)和缺乏纺锤体损害了特定卵母细胞的受精能力和进行平均的植入前生长。另外,cp引起的透明带硬化也会对正常的施肥过程产生负面影响。但是,与胚胎冷冻相比,卵母细胞冷冻具有更多的优点:
 
 
(1)因肿瘤治疗、卵巢早衰或慢性疾病而易失去生育能力的妇女的男性能力保持;
 
(2)有助于缓解胚胎保存的宗教及其他道德、法律和伦理问题;
 
(3)有助于克服一些问题,如丈夫不能提供可行的精子样本,或在出现非梗阻性无精子症的情况下,在某一时刻睾丸内不能识别精子;
 
(4)通过消除捐赠者和受赠者的同步问题,使卵子库和卵子捐赠成为可能;
 
(5)它允许妇女将分娩推迟到更晚的时间或年龄(例如,在建立新的职业之后,等等)。
 
当卵母细胞被冷冻用于非医学目的时,后者通常被称为人际冷冻。近十年来,随着卵母细胞冷冻技术的不断进步,有关非医学目的的卵子贮存概率问题在欧美各国的普通人群和专业委员会中得到了更广泛的讨论和认可。社会冻结的目的是防止与年龄有关的生育率下降,这通常是由全球各地的生育诊所和非学术媒体广泛宣传的。一个新的事实是,女性的生殖能力大约在25-30岁之间。此后,生育率从35岁开始迅速下降,再加上流产率显著上升。
 
在43岁以后,怀孕的几率要低得难以置信。与20-30年前相比,女性决定在晚期生育是一种全球趋势。我们获得冷冻周期的患者信息表明,在过去十年中,Indira IVF和Amritsar试管婴儿治疗中心的Shilpa Gulati医生的平均年龄(n=3601)从31.8岁增加到35.4岁。
 
在冷冻胚胎存活率中,年龄的影响是显著的,在过去的十年中,由于特定患者的平均年龄增加了四岁,而在冷冻过程中没有做任何改变(89%对81%;p<0.0001)。30岁以上活动性冷冻周期明显减少,35岁以上与30岁以下有显著性差异(p<0.01和p<0.0002)。
 
胚胎/卵母细胞cp的成功率取决于几个变量:冷冻程序的效率、用于玻璃化冷冻的载体(开放式与封闭式)、辅助生殖系统计划中cp的周期规则性,选择冷冻胚胎或卵母细胞的条件,以及新鲜胚胎移植的结果。结果可以表示为存活率(但这还不够,必须保持细胞器的正常生理功能)、着床率、妊娠率,甚至每一个传播或解冻的胚胎或收获的卵母细胞的分娩率都会通知阿姆利则的生育医生。
 
通常,用于cp的传统缓慢冷却程序称为平衡冷却,而快速/超快速程序(玻璃化)称为非平衡冷却。除采用平衡或非平衡冷却方法冷冻卵母细胞外,影响胚胎存活的因素也很多。
 
冷冻卵子
 
胚胎和卵母细胞的常规缓慢冷却
 
在胚胎和卵母细胞的cp过程中,最棘手的挑战是除了有毒的溶质浓度之外,还要阻止冰晶的产生,这是导致cp引起细胞死亡的两个主要原因,尽管保持了细胞内细胞器的功能和胚胎或卵母细胞的特殊活力。因此,为了实现这一目的,通常细胞悬浮在其中的冷冻溶液必须补充冷冻保护添加剂(CPA)。接触cpa有助于特定细胞脱水,减少细胞内冰的形成。cpa可分为两组:细胞内/膜渗透(即丙二醇/pg/、dmso、甘油/g/、乙二醇/eg/)和细胞外/膜不渗透化合物(即蔗糖、海藻糖、葡萄糖、amid、ficoll、蛋白质和脂蛋白)。
 
 
渗透性cpa通过渗透梯度置换水,并部分占据细胞内水的位置,而细胞外cpa增加细胞外渗透压,在cp之前产生跨特定细胞膜的渗透梯度,支持细胞脱水。同时,它有助于防止在渗透性cpa的再水化/稀释过程中解冻后的水快速进入细胞,amritsar的indira ivf生育治疗中心的shilpa gulati博士说。
 
细胞的脱水主要取决于细胞膜的渗透性。不同种胚对水的渗透性和对cpa的渗透性存在差异。胚胎对pg或eg的渗透性通常较低。此外,发育阶段越早,特定胚胎的渗透性通常越低。早熟卵母细胞和成熟卵母细胞的通透性是波动的,在单个mii卵母细胞之间变化仅为7倍。
 
膜通透性的这种差异可能对卵母细胞缓慢冷冻的特定结果有很大的影响,但可以通过提高不透性cpa的浓度和环境温度来控制。据报道,通过提高不渗透性cpa(蔗糖:0.2和0.3 m)的水平,可以提高存活率,冻融卵母细胞的一般受精率似乎与新鲜卵母细胞的受精率相似。
 
在缓慢冷却之前,胚胎/卵母细胞的脱水通常是通过直接接触渗透性和非渗透性cpa(持续时间:10分钟)进行的。对于人类胚胎/卵母细胞,除少数例外,低浓度的pg(1.5 m)和蔗糖(0.1–0.25–0.5 m)用于早期卵裂期胚胎和卵母细胞,g用于囊胚期胚胎。如果有最初成功的CP方案小鼠,牛胚胎以缓慢的冷却速度(在-0.3°C-0.5°C/min之间)冷却到-80°C-120°C的浅温度范围。因此,程序的长度非常长(几个小时)。Willadsen和Willadsen等人描述了这种特殊方法的一种变化,即在绵羊和牛胚胎被直接投入液氮(LN2)之前,以0.3°C/min的新速率缓慢冷却,但仅冷却到-30-35°C。通过这种特殊的修改,CP过程的持续时间大大缩短(1.0-1.5小时)。
 
从那时起,这一特殊的短期方案就成为冷冻家畜胚胎的首选治疗方案。尽管动物胚胎取得了显著的效果,但人类胚胎通常是以0.3°C/min的降温速率冷冻到大约-30°C到40°C,然后以-50°C/min的升温速率冷冻到-80°C到-150°C,然后再投入液氮中。在缓慢冷却过程中,通常认为脱水过程会一直持续到零下30°C,之后任何剩余的水通常都会被过冷。在整个缓慢冷却阶段,冰核(种子)将在-5到-8°C(接近溶液的实际冰点)之间手动诱导。胚胎/卵母细胞缓慢冷却至零下30°C至40°C,然后过冷至零下196°C,需要在25°C至37°C的温水中快速升温/解冻,在阿姆利则的Indira IVF医院接受过Shilpa Gulati博士的教育。
 
快速解冻是指从胚胎或卵母细胞中取出cpa。细胞的再水化通常是在降低渗透性cpa浓度的情况下进行的,通常是在不渗透性cpa浓度增加的情况下进行的。一个典型的医学实践是逐步从特定的冷冻胚胎或卵母细胞中稀释cpa。使用不渗透的溶质,如蔗糖作为渗透屏障,减少了渗透性水杨酸的机会。
 
胚胎和卵母细胞的玻璃化冷冻(超快速冷冻保存)
 
玻璃化冷冻是胚胎和卵母细胞冷冻保存的一种替代方法,近年来被认为是一种革命性的技术;另一方面,第一次成功的胚胎玻璃化冷冻是在80年代中期左右发表的。玻璃化冷冻与缓慢冷冻是不同的,因为它避免了在细胞内和细胞外空间产生冰晶。它是在低温下通过显著提高粘度而使溶液凝固而不形成冰晶,这是一种由高浓度CPA(4-8摩尔/升)和极高(超快)冷却速度混合而成的过程。与缓慢冷冻相比(当胚胎和卵母细胞中的脱水在特定冷冻溶液的平衡过程中开始时,刚好在缓慢冷却之前,并在整个缓慢冷却过程中持续到零下30-35度)。在玻璃化过程中,细胞主要在超快速冷却开始前脱水,直接暴露于高浓度的CPA中,这是很快获得玻璃化细胞内和细胞外状态所必需的。玻璃化过程的实际风险通常是高浓度的cpa,最终可能对细胞有毒。
 
 
 
然而,可以通过混合不同的cpa来限制cpa的毒性,从而减少每个cpa的相对焦点,并且仅仅将胚胎和卵母细胞对溶液的暴露时间减少到最小。通常用于玻璃化冷冻的冷冻溶液通常由渗透剂(例如,g,dmso,pg,乙酰胺;>4m)和非渗透剂(例如,蔗糖,海藻糖>0.5m)组成。在一些方案中,玻璃化培养基同样添加了诸如聚乙二醇、菲科尔或聚乙烯吡咯烷酮等大分子。通过提高粘度,大分子有助于玻璃化与低水平的cpa。为了进一步提高有效玻璃化冷冻所必需的冷却速度(>10.000.c/min),玻璃化冷冻特定胚胎和卵母细胞的溶液体积最近急剧降低(0.1-2.8201;ml)。因此,为了实现这一点,已经创造了特定的载体系统(开放式和封闭式),例如自由拔出的吸管、可弯曲的脱pet吸管、冷冻顶、电子显微镜铜网格、冷冻环,甚至半吸管系统。
 
 
出于安全考虑,已开发了封闭方法。比较特定的开放和封闭方法,Bonetti等人使用封闭载体报道了可接受的存活率,但在卵母细胞的细胞质中有许多小泡,这通常是封闭方法中温度下降不够快的可能结果。尽管如此,由于投注的结果,典型的玻璃化冷冻的应用,特别是关于人类囊胚和卵母细胞的冷冻保存,最近在阿姆利则的indira ivf和试管婴儿治疗中心由shilpa gulati博士提出,得到了显著的提高。
 
 
由于浓缩、粘性和小体积的玻璃化冷冻溶液,胚胎和卵母细胞必须在玻璃化冷冻之前和通过玻璃化冷冻处理至少一段时间(<1-8201;min),因此技术上玻璃化冷冻很难进行。因此,为了达到最佳/高存活率,进行玻璃化冷冻的胚胎学家必须接受良好的培训。如果胚胎和卵母细胞逐渐冷却(使用特定的细胞冷冻器),则不一定是缓慢冷冻的情况,因为缓慢冷冻是一种更灵活的方法。类似于缓慢冷冻,快速解冻对于玻璃化冷冻胚胎和卵母细胞的最佳存活率是必要的,然后简单地使用缓慢冷却后采用的相关技术进行逐步再水化,这是阿姆利则Indira IVF中心的Shilpa Gulati博士解释的。
 
缓慢冷却玻璃化冷冻保存人胚胎的功能
 
一般来说,pg用于受精卵和卵裂期胚胎的冷冻,g用于囊胚的冷冻保存。多年来,人类胚胎冷冻保存的推荐阶段是合子期和早期卵裂期。考虑到只有25%的合子能够在常规培养基中达到体外囊胚期,胚泡冷冻被放弃多年,并且总体上降低了妊娠率。在一种新的胚胎培养系统中,如在饲养细胞上的共培养以及连续培养基的开发,使得在50-60%的情况下获得高质量的囊胚成为可能。因此,在过去的8-10年中,胚泡冷冻保存的意义提高了。此外,一些已发表的数据显示,使用顺序培养基获得的人囊胚似乎只有50%的抗冻性,正如阿姆利则indira ivf诊所的shilpa gulati博士强调的那样。
 
如果早期卵裂期胚胎在解冻后至少保持50%的原始胚芽完整,那么它们被认为是存活的超低温保存胚胎。细胞的中度丢失对着床无明显影响。在先前的一项大规模多中心研究中,有14000个卵裂期较慢的冷冻和解冻胚胎,已经确定73%的胚胎至少有一半的初胚泡仍然完整,结果显示医学妊娠率和着床率分别为16%和8.4%。分别在转移后。在另一项与300多个4细胞期第2天胚胎的单次冷冻胚胎移植相关的研究中,特定胚胎在冷冻/解冻过程中仅丢失一个卵裂球(25%),与完全完整的冷冻胚胎和新鲜胚胎相比获得。从1.5 mpg和0.1 m蔗糖的缓慢冷却经验中提取的数据约占所有冷冻卵裂期胚胎冷冻保存存活率的75%至85%,所有解冻胚胎的50%至60%可能保存(100%的卵裂球存活)。
 
提高冷冻前未渗透的cpa、蔗糖的浓度,可以提高卵裂期胚胎的低存活率。埃德加等人注意到将蔗糖的强度从0.1 m增加到0.2 m可显著提高存活率。不仅存活率提高了,完整胚胎的比例也大幅度增加(54.6%对80.5%)。解冻后的每一个胚胎的着床率也有所上升,但没有达到实质性水平(22.1%对17.5%)。这项改良的缓慢冷冻技术加上蔗糖浓度的增加,产生的结果相当于在阿姆利则的indira ivf中心的shilpa gulati博士的玻璃化澄清所获得的最佳结果。
 
最广泛使用的缓慢冷却囊胚的冷冻液通常是g和蔗糖的混合物。记录在案的内细胞团和滋养层细胞的存活率至少为50%,约为69%-98%,通常植入率接近16%-30%。资料显示,开发价格对生存率有影响。冻融囊胚的体外再膨胀被认为是成功的一个好兆头(70-80%的冻融囊胚)。无论是否进行pgd活检,慢冷却囊胚的存活率为88%。
 
在同一研究中,新鲜(34%)和解冻(35%)的pgd囊胚的着床率是可比的。根据对400个冻融胚胎的研究,发现在第3天和第5天冻存的胚胎存活率、妊娠率和着床率没有变化。然而,在阿姆利则的indira ivf和生育治疗中心的shilpa gulati医生说,在怀孕组中,第5天的囊胚着床水平明显高于第3天的胚胎着床水平。
 
在dmso、eg、dmso+蔗糖、eg+蔗糖、dmso+eg+蔗糖为中心溶液和cca中成功地玻璃化了人早期胚胎。60%到80%的存活率,至少50%的原始卵裂球没有改变,并且报告了几次怀孕/分娩(怀孕率:10%-15%)。Kuwayama等人用eg+dmso+蔗糖玻璃化冷冻卵裂期胚胎,结果显示存活率略有提高(98%vs 91%),但缓慢冷却后妊娠率没有变化。
 
在类似的比较研究中,比较逐渐冷却和玻璃化冷冻的存活率和植入率没有区别。巴拉班等人。使用pg+eg+蔗糖基溶液可获得较高的存活率(94.8%vs)
 
卵母细胞慢速冷冻或玻璃化冷冻保存的体会
 
自从人类卵母细胞冷冻领域取得初步成功以来,变化就直接被引入到缓慢冷却过程中。在更为缓慢的冷冻和玻璃化冷冻溶液中(从0.1 m增加到0.3 m),蔗糖浓度的增加以剂量依赖的方式提高了mii卵母细胞的脱水率以及存活率和受精率。改变平衡热、cpa、冰核(播种)和将胚胎直接注入ln2、用胆碱代替钠(低钠培养基)或将蔗糖直接注入卵母细胞的细胞质都能提高卵母细胞的存活率。这些结果表明,在阿姆利则的indira ivf和试管婴儿治疗中心,shilpa gulati博士保证,卵母细胞缓慢冷冻的效果仍有提高的空间。
 
与新的对照组相比,在0.3 m蔗糖中逐渐冷却的卵母细胞中,第一次卵裂的时间和第二天达到的发育阶段都较慢。konc等人报告了相似的受精率(新鲜:83%;冷冻:76%),但在特定的冷冻保存组中发育相当缓慢,尽管每个胚胎和卵母细胞的着床率相似(新鲜:18%和11%;冷冻:15%和7%)。他们的研究结果显示,冷冻和新的卵母细胞组在第2天的细胞期有非常显著的变化(p<0.05),因为他们发现在特定的冷冻卵母细胞周期中胚胎发育比新鲜周期减少。在冷冻组中,64%的胚胎处于2细胞期,17%的胚胎在第2天处于4细胞期。然而,在第2天的新组中,66%的胚胎目前处于4细胞期,只有25%的胚胎处于2细胞期。
 
解冻后立即分析的卵母细胞显示,缓慢冷冻或玻璃化冷冻后,纺锤体出现严重的紊乱或消失。然而,在冷冻保存后培养卵母细胞一到三小时可以使纺锤体重新聚合。Martinez Burgos等人注意到玻璃化冷冻似乎能够以更高的速率维持纺锤体装置;由于玻璃化冷冻的卵母细胞通常比缓慢冷却的卵母细胞更好、更快地重新聚合纺锤体;然而,它们显示减数分裂纺锤体和极体。奇怪的是,他们在缓慢冷却和玻璃化之间没有发现DNA断裂的区别。Ciotti等人还注意到玻璃化冷冻卵母细胞的纺锤体恢复比缓慢冷却型更快。
 
相反,Cobo等人发现相当的纺锤体恢复来自玻璃化和缓慢冷却后3小时的孵化。konc等人分析了冻融人卵母细胞的纺锤体动力学或位移。在每个卵母细胞中,在冷冻前和解冻后以及在icsi前3小时的体外培养中,用多道镜确定纺锤体的存在和位置。他们的结果表明,通过观察单个卵母细胞的反应,纺锤体在卵母细胞内的原始位置并不总是改变。在卵母细胞解冻和培养后,84.3%的卵母细胞出现纺锤体。然而,这些人发现,在50%的卵母细胞(53.1%)中,纺锤体被重建/可视化,它是在一个新的位置被检测到的,而不是在最初的位置,这表明纺锤体和极体是按照彼此的方式移动的,Shilpa Gulati博士解释说阿姆利则的Indira IVF医院。
 
可能最广泛使用的玻璃化冷冻溶液包含渗透性(2.7 m eg和2.1 m dmso)和非渗透性cpa(0.5 m蔗糖)的混合物。随着玻璃化冷冻技术的发展(即降低玻璃化冷冻介质的体积和惊人的冷却速度)获得的新数据表明,玻璃化冷冻人卵母细胞的解冻后存活率和取食率都有所提高,这与新的对照卵母细胞相似。科博等人。公布了他们在一个卵子捐赠项目中对超过3000个新鲜和玻璃化冷冻卵母细胞(92.5%存活率)的随机处理试验中的发现,证实玻璃化冷冻对随后的受精、发育或着床没有有害影响。其他人使用相同的玻璃化冷冻方案,也在卵母细胞捐赠项目,报告了类似的结果。在标准不孕方案中使用相同技术获得的结果显示,玻璃化冷冻卵母细胞的总体临床结果较低,尤其是34岁以上的卵母细胞。
 
比较缓慢冷冻和玻璃化冷冻的结果,我们必须考虑到几乎所有由卵母细胞玻璃化技术开发的公开数据。
 
卵母细胞和胚胎冷冻保存的安全性及其它问题
 
全球所有通过冷冻和解冻卵母细胞受精出生的儿童都超过1500人。研究表明,在卵母细胞冷冻保存后发育的孕妇和婴儿不会出现新的产科不良结果或先天性异常的机会。在解冻的卵母细胞中,未发现异常染色体或游离染色体数量的增加。此外,在比较新鲜和冷冻卵母细胞获得的人类胚胎染色体异常的患病率时也没有发现差异。这项对13名冷冻卵母细胞出生的儿童进行的特别随访研究未能揭示出染色体或器官形成的任何异常,提示了分娩年龄和平均出生体重。在另一项研究中,从冷冻卵母细胞发育而来的儿童没有智力和发育障碍。
 
尽管取得了令人满意的结果,但你可能仍然会对后代染色体非整倍体或其他核型不规则、器官畸形或其他发育问题的可能性感到担忧;因此,进一步的后续研究涉及到令人满意数量的患者。他们在阿姆利则的indira ivf诊所告诉shilpa gulati医生,希望能澄清这个基本问题。
 
对于因化疗、放疗和放射外科手术而面临不孕的患者来说,卵母细胞冷冻保存是保持其生育潜力的少数选择之一。因此,辅助生殖技术学会实践委员会、美国生殖系统医学学会实践委员会和美国临床肿瘤学学会的观点是:
 
(1)卵母细胞超低温保存有望成为未来女性不孕症的保存方法。
(2)最近的实验室改变导致了冷冻卵母细胞的存活率、受精率和产卵率的提高。
(3)在冷冻卵母细胞出生的儿童中,没有发现染色体异常、出生缺陷或发育失败的增加,以及
(4)卵母细胞冷冻保存不应再被视为一个实验过程,必须仅推荐给癌症患者,并在获得适当知情同意的情况下进行,阿姆利则Indira IVF医院的Shilpa Gulati医生提醒说。
 
目前,精子、胚胎或卵母细胞常用玻璃化瓶和新开发的开放式或封闭式载体冻存于液氮中。考虑到冷冻容器在冷冻过程中可能泄漏或破碎,液氮污染的可能性是一个真正的危险,特别是在为胚胎或卵母细胞超快速冷却玻璃化而开发的开放载体的情况下。在生物材料的液氮储存空间中交叉污染的发生以及随后患者的交叉感染已经被证实。病毒已经被发现可以直接暴露在液氮中存活,包括水泡性口炎病毒、单纯疱疹病毒、腺病毒和乳头状瘤病毒。
 
有证据表明LN2被其他微生物污染,包括各种细菌和真菌。在一定条件下,只要有证据表明ln2被微生物污染和交叉感染,生殖细胞冷冻保存过程中的污染或交叉污染的可能性就应该被认真考虑。有许多相对简单的细节和可能改变的低温保存过程。同时,这可以最大限度地降低储存样品的污染或交叉污染的可能性。例如,所有将被冷冻保存生殖细胞的患者和捐赠者都应进行筛查(如HBV、HCV、HIV等);强烈建议每一次感染都将受感染的材料储存在独立的容器中;作为开放系统、封闭系统的替代应用于玻璃化;最后,应定期清空和清洁储存容器。然而,在一项比较研究中,所有冷冻保存在密封吸管和冷冻瓶中的胚胎都没有病毒污染。在阿姆利则的indira ivf和试管婴儿治疗中心,shilpa gulati博士总结道,玻璃化的织物以最小的数量运输也可能引起与其对存活率的影响有关的问题。
 
胚胎和精子cp是目前人类辅助生殖的常规方法,而卵母细胞冷冻保存通常被引入医学实践,并得到越来越广泛的应用。胚胎冷冻降低了新鲜胚胎移植的数量,最大限度地提高了体外受精过程的性能。数据显示,接受新鲜和冷冻胚胎移植的妇女利用冷冻胚胎获得了8%的额外生育。与胚胎相比,卵母细胞冷冻保存更具优势。
 
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